AID的操作规程

1、确定适应症，排除禁忌症。通过认真详细询问病史及查体，进行必要的化验检查，依照上述标准男科及女科医生共同讨论确定。

2、签署知情同意书：按照AID知情同意书的内容充分向患者夫妇交代知情，使其充分了解其权利及义务，在充分知情同意的前提下，签署《供精人工授精知情同意书》、《多胎妊娠减胎知情同意书》、《供精人工授精随访知情同意书》、《供精助孕治疗夫妇后代婚育排查知情同意书》，并填写患者需求表。对于上述适应症1.2.3.中除不可逆的无精子症外，另外签署《申请供精人工授精助孕知情同意书》。

3、查验有效证件。按照卫生部要求患者夫妇要提供双方身份证、结婚证、无子女证明（县、乡、街道计划生育部门审核盖章）或多胎指标，（其中无子女证明要原件，多胎指标在医护人员核对原件后复印，无子女证明及多胎指标一年有效）及户口簿的复印件。

4、由经治医生认真书写AID病志，将知情同意书、有效证件及必要的化验单等病历资料装订成册，永久保存。

5、预约精源：按照患者的需求，结合精子库所提供的精源体貌卡选定精源，尽量要选择与不孕夫妇男方血型一致的精源。

6、确定排卵

（1）宫颈黏液检查：宫颈黏液随着雌孕激素的周期变化而呈现周期的变化，近排卵期时宫口张开，黏液拉丝度可达10cm以上。此时，黏液最清，最有利于精子通过，这些现象均提示即将排卵。排卵后宫颈黏液分泌量减少，拉丝度仅为1~2cm。宫颈黏液排卵期呈典型的羊齿植物状结晶，排卵后或妊娠期呈椭圆体。

（2）性激素测定： LH、E2、PI LH测定：排卵发生在血LH峰起点后34~35小时或尿LH后12~24小时。临床上常测定尿LH峰来预测即将排卵，方法简单，价廉，患者可在家自行监测。II、 E2测定：在正常月经周期中，E2值呈周期性变化，目前临床上常用简便且无创伤的方法可间接了解E2水平，如宫颈黏液情况，再结合尿LH的连续监测并配合B超等，可确定有无排卵及排卵时间。III、P测定：排卵前夕成熟卵泡可产生少量P。在正常月经周期中的卵泡期血中P值不超过3.2nmol/L，晚卵泡期若发现血中P值出现上升，则表示即将排卵。若P值＞9.6nmol/L，则可诊断已排卵。

（3）B超监测卵泡发育

于月经周期的第11天或促排卵治疗周期的第3~5天开始监测卵泡发育，根据卵泡大小隔日或隔数日再监测，当卵泡直径≥18×18mm，且尿LH化验阳性，当日行人工授精，并可于排卵后再授精一次；如果卵泡直径≥18×18mm，尿LH阴性或弱阳性时，注射HCG5000-10000IU， 24小时后行人工授精。

7、药物促排卵方法：对于有排卵障碍的患者，采取以下方法促排治疗。

（1）克罗米酚（CC）：月经第3～5天开始每日口服克罗米酚50mg～100mg，连服五天；

（2）尿促性素（HMG）75IU或150IU，每日肌肉注射；

（3）、CC结合HMG：月经第3～5天 CC50-100mg，每日一次口服，月经第5～7天 HMG 75～150IU，每日一次肌注；

（4）、果那芬（GONAL-F）75或150IU，每日一次肌注。

当B超监测至少有一个卵泡直径≥18×18mm时，给予HCG5000-10000IU肌注，注射后的36-48小时行人工授精。

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８、实验室操作常规

（１）、器械和物品准备

装满液氮的冷冻储存罐2个、配置阴道探头的B超仪、离心机、恒温水浴锅、生物显微镜、解剖显微镜、百级超净工作台、CO2培养箱、冰箱、精液分析仪、精子计数板、1ml一次性无菌注射器、10μl微量加样器、微量吸头、装2ml冻存管管架的塑料盒子。

（２）精子处理培养液的准备

Ⅰ精子冲洗培养液（ART-1006）ART-1006开瓶后每10ml分装入14ml一次性塑料试管（352001）中，置4℃-8℃冰箱中保存。使用前紧盖放入37℃、5%CO2培养箱中平衡4—12小时。Ⅱ精子孵育培养液（ART-1020）配制5%人血清白蛋白（HSA，ART-3001）的ART-1020培养液，然后装入352001中混匀，使用前松盖放入37℃、5%CO2培养箱中平衡4--12小时。Ⅲ90% Percoll（密度梯度离心）液（Sigma）取Percoll 液9ml加入15ml一次性刻度离心管中（352097），再加入1ml  10×Earle’s培养液（Sigma）混匀，即成90%Percoll 液，置4℃-8℃冰箱中保存。临用时置室温中待用。

（３）、精子标本处理操作步骤

Ⅰ、精子复苏

认真核对患者夫妇姓名，各种记录表内容要仔细填写。复苏时必须经2人核对Donor密码后，方可进行精子解冻。解冻时先将精子冷冻管盖松开，然后放入37℃水浴锅十分钟即可。Ⅱ、精子处理

①、二次混合离心后上游：

复苏后的精子标本吸入装有3ml ART—1006的352097中，混匀后3000 转 / 分，离心 5分钟，弃去上清液，再重复上述过程1次，然后贴管壁小心加入0.5-1.0 mlART—1020，置37℃、5%CO2培养箱中孵育30分钟，最后将上层ART—1020吸入6ml一次性试管（2003）中，置37℃、5%CO2培养箱中待用。

②、Percoll法：取6ml ART—1006，分别放入2支352097中，每支3ml。将复苏后的精液标本放入装有3ml ART—1006的352097中，混匀后3000 转 / 分，离心 5分钟，弃去上清液，加3ml ART—1006混匀后700转/分，离心30秒，吸取上清液贴管壁小心加入到90% Percoll 液的上面，3000转/分，离心15分钟，吸去上层精液和部分95% Percoll液，将底部沉淀物移入装有3ml ART—1006的352097中3000 转 / 分，离心 5分钟，弃上清液，加入3ml ART—1020，3000 转 / 分，离心 5分钟，弃上清，贴管壁小心加入1.0 ml ART—1020，置37℃、CO2培养箱中孵育30分钟，最后将上层ART—1020吸入2003中，置37℃、5%CO2培养箱中待用。

（４）、精子移植

Ⅰ、阴道内移植（IVI）

用移植管吸取复苏后的精子标本进行IVI。

Ⅱ、宫腔内人工授精（IUI）

用移植管吸取复苏后经过处理的精子标本0.5—0.8ml，一般不超过1.0ml，进行宫腔移植，再将剩余标本吸入移植管，进行宫颈内移植（ICI）。

９.  人工授精临床操作方法：

患者排空膀胱后取膀胱截石位。庆大霉素、生理盐水擦拭外阴及阴道分泌物。通过宫颈将IUI导管插入宫腔缓慢将洗涤处理后的精液0.5～0.8ml经导管注入宫腔（IUI）或将复苏后的精子注入宫颈（ICI）或注入阴道内（IVI）。术后卧床休息1小时。黄体支持治疗：黄体酮20mg，每日一次肌注，连续20天。授精后20天查血或尿HCG，确定生化妊娠。确定生化妊娠后2周B超检查妊娠情况（是否是宫内妊娠、妊娠胎数）。将结果记录于病历中。如果发现优势卵泡未破裂,在LH峰后40小时左右可行卵泡刺破+宫腔内人工授精。 

2004年建院开诊，总建筑面积约2.6万平方米，床位200余张。拥有飞利浦和西门子超声仪、美国贝克曼和德国西门子全自动化学发光分析仪、全自动精液分析仪、德国全自动血凝分析仪、美国史赛克和德国狼牌电子腹腔镜、美国欧美达麻醉监护系统、东软500毫安DR，X线成像系统等；11间层流手术室；拥有国际一流的胚胎培养室和人工授精室。